染色原理:
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理不阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson染色特点:
1、染色稳定
2、分化时间短,1~2s
3、色彩清晰鲜艳
4、适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色
5、所染切片保存时间长且不易褪色
Masson染色步骤
1、切片常规脱蜡至水,用配制好的Weigert铁苏木素染色5~10min。
2、用酸性乙醇分化液分化,水洗。
3、用Masson蓝化液返蓝,水洗。
4、蒸馏水洗1min。
5、丽春红品红染色液染色5~10min。
6、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗1min。
7、磷钼酸溶液洗1~2min。
8、用配制好的弱酸工作液洗1min。
9、直接入苯胺蓝染色液中染色1~2min。
10、用配制好的弱酸工作液洗1min。
11、95%乙醇快速脱水。无水乙醇脱水3次,每次5~10s。
12、二甲苯透明3次,每次1~2min。中性树胶封固。