裸鼠成瘤实验是从体外细胞试验到动物水平体内试验,是基因功能研究的重要飞跃。动物实验,由于其更能模拟人类的生理和病理条件,在科研上,动物实验获得的结果,将有更强的说服力。肿瘤研究中,最常规的动物实验就是裸鼠成瘤实验。由于大部分肿瘤研究使用的是人类细胞,所以由于异种排斥的存在,我们需要免疫缺陷型小鼠来作为移植瘤模型的载体,通过对该小鼠的注射肿瘤细胞,使其成瘤,观察流体的生长来判断其生物学变化。
病理实验检测技巧:
1. 预实验。通过查文献看看要用的细胞系能不能成瘤,注射的细胞数量,注射条件等,查完以后做一次预实验,设置几个细胞量的梯度,看看文献报道的是不是可行。一般预实验注射5只小鼠。
2. 裸鼠成瘤受外界影响很大,裸鼠来源,鼠房环境,细胞状态(尤其重要)。国内的细胞系和鼠房条件都很多不可控,一定要小心。支原体对成瘤和药物敏感性影响很大,细胞要无支原体,注射前细胞保持冰上。
3. 不成瘤的时候可以换NOD SCID小鼠或者干脆换细胞系。
4. 注射的时候一定要注意别打漏了或者打到肌肉里,这样出来的瘤子体积一致性很差。我一般采用进针以后针尖向上挑,打的体积不超过200ul。
5. 小鼠周龄不要太大,一般控制在7周以内。